總大(dà)腸菌群是(shì)作(zuò)為(wèi)糞便污染指标菌提出來(lái)的(de),主要(yào)是(shì)以該菌群的(÷ ÷de)檢出情況來(lái)表示水(shuǐ)中是(shì)否有(y¶ ∑ǒu)糞便污染。總大(dà)腸菌群數(shù)的(de)高(gāo)低(dī),表明(γ±λmíng)了(le)糞便污染的(de)程度,也€★(yě)反映了(le)對(duì)人(rén)✔♦≈≈體(tǐ)健康危害性的(de)大(dà)小(xiǎo)。糞便是(♣₩shì)人(rén)類腸道(dào)排洩物(wù),÷₹糞便內(nèi)除一(yī)般正常細菌外(wài),也(yě)會(h>γ ±uì)有(yǒu)一(yī)些(xiē)腸道(dào÷β ₹)緻病菌存在(如(rú)沙門(mén)氏菌、志(zhì¶∑©)賀氏菌等),因而水(shuǐ)中有(yǒu)糞便污染,則可(kě)以推測該水λ÷γ∏(shuǐ)存在著(zhe)腸道(dào)緻病菌≥₽© 污染的(de)可(kě)能(néng)性,必須看(kàn)作(zuò)對'¥(duì)人(rén)體(tǐ)健康具有↑δ(yǒu)潛在的(de)危險性。
目前,用(yòng)于檢測大(dà)腸菌群的♣¶(de)方法有(yǒu)多(duō)管發酵法、濾膜法、紙(zhǐ)片快(kuài)速法、酶底物(wù)法等。但(dàn)是(shì)小(xiǎo)編發現(xiàn)在行(xíng)業(y αè)存在将濾膜法和(hé)紙(zhǐ)片快(kuài)速法弄混的(>₹de)現(xiàn)象,認為(wèi)紙(zhǐ)片法是(shì)不(bù)用(y↑☆Ω òng)抽濾的(de)濾膜法,其實這(zhè)×≠φ是(shì)兩個(gè)完全不(bù)同的(de)檢測方☆σ≥法,今天我們來(lái)了(le)解一(yī)下(xià)這(zhè)兩個(↔©'gè)方法的(de)基本原理(lǐ)、操作(zuò)步驟↕£Ω£及優缺點等。
濾膜法
檢測原理(lǐ)
用(yòng)孔徑為(wèi) 0.45 μm 的(de)微(wēi)孔濾膜過濾水(shuǐ)樣後,将濾膜貼在選擇性培養基上(shàng)培養後,能(néng)形成典型菌落經革蘭氏染色和(hé)證實試驗,來(lái)檢測水(shuǐ)中總大(dà)腸菌群的(de)方法↔÷γ。
檢測步驟
圖 2 濾膜法操作(zuò)步驟
紙(zhǐ)片快(kuài)速法
按最大(dà)可(kě)能(néng)數(shù)(MPN)法✘©,将一(yī)定量的(de)水(shuǐ)樣以無菌操作(zuò£≥)的(de)方式接種到(dào)吸附有(yǒ♣∞♦Ωu)适量指示劑(溴甲酚紫和(hé)2,3,5-氯化(huà)三ε✘δ苯基四氮唑即TTC)以及乳糖等營養成分(fēn)的(de)無菌濾紙 (zhǐ)上(shàng),在特定的(de)溫度(37℃)培養18-24h✘ £,當細菌生(shēng)長(cháng)繁殖時(shí),↓δ®産酸使pH值降低(dī),溴甲酚紫指示劑由紫色變黃(huáng)色,同時(shí),産氣過程相(xiàng)應的(de)脫氫酶在适宜™♦β÷的(de)pH範圍內(nèi),催化(huà)底物(wù)脫氫還(háiαβφ)原TTC形成紅(hóng)色的(de)不(bù)溶性三苯甲臜(T§<&TF),即可(kě)在産酸後的(de)黃(huáng)色背景下(x≈♦↑ià)顯示出紅(hóng)色斑點(或紅(hóngα¶)暈)。通(tōng)過上(shàng)述指示劑 ×的(de)顔色變化(huà)就(jiù)可(kě)對(duì)是(s★★↑✘hì)否産酸産氣作(zuò)出判斷,從(εcóng)而确定是(shì)否有(yǒu)總大(dà)腸菌群↔ 存在,再通(tōng)過查MPN表就(jiù)可(kě)得(d±↑e)出相(xiàng)應總大(dà)腸菌群的(d≤λ"e)濃度值。
圖 3 紙(zhǐ)片法操作(zuò)步驟∑∞(目标水(shuǐ)樣、空(kōng)白(bái)、陰性、陽性均按此≈≥步驟)
注意:由于飲用(yòng)水(shuǐ)含菌量低(dī£≤),在使用(yòng)紙(zhǐ)片快(ku ®ài)速法是(shì)應培養足夠的(de)≠∑α時(shí)間(jiān)方可(kě)得(de)到(dào)準确的♣∏♠☆(de)結論。另外(wài)水(shuǐ)質樣品色度變化(huà)會÷∞←÷(huì)幹擾紙(zhǐ)片法的(de)陽性紙(zhǐ)片判讀(↕>←dú),随著(zhe)水(shuǐ)質樣品色度的(δ♥de)增加,可(kě)判讀(dú)的(de)陽性紙(β÷zhǐ)片數(shù)會(huì)逐漸減少(φ♠£shǎo)。
兩種方法比較
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