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總大(dà)腸菌群 | 濾膜法與紙(zhǐ)片快(kuài)速法

2023-12-15 14:11 
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總大(dà)腸菌群是(shì)作(zuò)為(wèi)糞便污染指标菌提出來(lái)的(de),主要(yào)是™σ₽‍(shì)以該菌群的(de)檢出情況來(lái‍₹)表示水(shuǐ)中是(shì)否有(yǒu)糞便污染。總大(dà)腸菌群數(shù)的(de)高(g←£Ωāo)低(dī),表明(míng)了(le)糞便污染的↓ε(de)程度,也(yě)反映了(le)對(α duì)人(rén)體(tǐ)健康危害性的(de)®ε"大(dà)小(xiǎo)。糞便是(shì)人(rén)類腸道(φ$λ>dào)排洩物(wù),糞便內(nèi)除一(yī)××δ®般正常細菌外(wài),也(yě)會(huì)有(yǒu)一(yī)些©λ♣(xiē)腸道(dào)緻病菌存在(如(rú)沙門(mén)≥↕氏菌、志(zhì)賀氏菌等),因而水(shuǐ)中$∏<≥有(yǒu)糞便污染,則可(kě)以推測該水(shuǐ)™✔'存在著(zhe)腸道(dào)緻病菌污染的(de)可π↕(kě)能(néng)性,必須看(kàn)作(zuò)對(duì)∑∑"Ω人(rén)體(tǐ)健康具有(yǒu)潛在的(de)危險性。

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圖 1 總大(dà)腸菌群(來(lái)源網絡)

目前,用(yòng)于檢測大(dà)腸菌群的(de)方法有(yǒu)多(duō)管發酵法濾膜法紙(zhǐ)片快(kuài)速法酶底物(wù)法等。但(dàn)是(shì)小(xiǎo)編發現(xiàn)在行(xí✔≤ng)業(yè)存在将濾膜法和(hé)紙(zhǐ)片快(kuài)速法弄混的(de)現(x✘£$iàn)象,認為(wèi)紙(zhǐ)片法是(shì)不(bù)用(yòng≥↕₽§)抽濾的(de)濾膜法,其實這(zhè)β≠σ₹是(shì)兩個(gè)完全不(bù)同的(de)☆↕α檢測方法,今天我們來(lái)了(le)解一(yī)下(xià)這(zhλ&è)兩個(gè)方法的(de)基本原理(lǐ)、φ≤操作(zuò)步驟及優缺點等。


濾膜法

檢測原理(lǐ)

用(yòng)孔徑為(wèi) 0.45 μm 的(de)微(wēi)孔濾膜過濾水(shuǐ)樣後,将濾膜貼在選擇性培養基上(shàng)培養後,能(néng)形成典型菌落經革蘭氏染色和(✘πhé)證實試驗,來(lái)檢測水(shuǐ)中總大(dà)腸‍✘菌群的(de)方法。

檢測步驟

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圖 2 濾膜法操作(zuò)步驟


紙(zhǐ)片快(kuài)速法

檢測原理(lǐ)

按最大(dà)可(kě)能(néng)數('π'™shù)(MPN)法,将一(yī)定量的(de)水(shuǐ×↕α)樣以無菌操作(zuò)的(de)方式接種到(&✔¶dào)吸附有(yǒu)适量指示劑(溴甲酚紫和(hé)2,3,5-€λ氯化(huà)三苯基四氮唑即TTC)以及乳糖等<✘營養成分(fēn)的(de)無菌濾紙(zhǐ)上(shàng)♣≈™,在特定的(de)溫度(37℃)培養18-2‌→ 4h,當細菌生(shēng)長(chánγ​©g)繁殖時(shí),産酸使pH值降低(dī),溴甲酚紫指示劑由紫色變黃(huáng)色,同時(shí),産氣過程相(xiàng)應的(de)脫氫酶 ®♣←在适宜的(de)pH範圍內(nèi),催化(huàβ××)底物(wù)脫氫還(hái)原TTC形成紅(h₽Ωóng)色的(de)不(bù)溶性三苯甲臜(TTF),即可(kě)在産酸後的(de)黃(huáng)色背景下(x≠¶ià)顯示出紅(hóng)色斑點(或紅(‌¥₩hóng)暈)。通(tōng)過上(shàng)述指示劑的(de)顔色≈±₩ 變化(huà)就(jiù)可(kě)對(duì)是(shì)否産酸産氣作(zu↕≠σεò)出判斷,從(cóng)而确定是(shì)否有(yǒu)總大(α©₽αdà)腸菌群存在,再通(tōng)過查MPN表就(jiù)可(kě)得(d≈λe)出相(xiàng)應總大(dà)腸菌群的(∞>→de)濃度值。

檢測步驟

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圖 3 紙(zhǐ)片法操作(zuò)步驟Ωα₽(目标水(shuǐ)樣、空(kōng)白(bá★‍i)、陰性、陽性均按此步驟)

注意由于飲用(yòng)水(shuǐ)含菌量低(dī),在使₹♠₽←用(yòng)紙(zhǐ)片快(kuài)速法是(shì)☆<←應培養足夠的(de)時(shí)間(jiān)方可(kě>↑λ)得(de)到(dào)準确的(de)結論。另外(wài)水(shuǐ)質樣£∏δ↓品色度變化(huà)會(huì)幹擾紙(zhǐ)片法的(de)陽♣'性紙(zhǐ)片判讀(dú),随著(zhe)水(₽•™↔shuǐ)質樣品色度的(de)增加,可(kě)判讀(dú)的(d®"π↓e)陽性紙(zhǐ)片數(shù)會(huì™γ§)逐漸減少(shǎo)。


兩種方法比較

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