總大(dà)腸菌群是(shì)作(zuò)為(wèi)糞便污染指标菌提出來(lái)的(de),主要(yào)是(shì)以該菌群的(de©$)檢出情況來(lái)表示水(shuǐ)中是(shì)否有(yǒu)糞便污¶¥ 染。總大(dà)腸菌群數(shù)的(de)高(gāo)低(βΩ∞dī),表明(míng)了(le)糞便污← ©♥染的(de)程度,也(yě)反映了(le)對(duì)人≠σ→₩(rén)體(tǐ)健康危害性的(de)大(dà)✘♥$&小(xiǎo)。糞便是(shì)人(rén)≤∞類腸道(dào)排洩物(wù),糞便內(nèi)除一(yī)般正常細菌外( wài),也(yě)會(huì)有(yǒu)一(yī)些(xiē)腸道§↔∑(dào)緻病菌存在(如(rú)沙門(mén)氏菌、志(zhì↑¶ε)賀氏菌等),因而水(shuǐ)中有(yǒu)糞便污εφ$φ染,則可(kě)以推測該水(shuǐ)存在✔↓$著(zhe)腸道(dào)緻病菌污染的(de)可(kě)能(né←←ng)性,必須看(kàn)作(zuò)對(duì)人(rén)體(t÷&ǐ)健康具有(yǒu)潛在的(de)危險性。
目前,用(yòng)于檢測大(dà)腸菌<'β群的(de)方法有(yǒu)多(duō)管發酵法、濾膜法、紙(zhǐ)片快(kuài)速法、酶底物(wù)法等。但(dàn)是(shì)小(xiǎo)編發現(xiàn)在行(x ≥íng)業(yè)存在将濾膜法和(hé)紙(zhǐ)片快(kuài)速法弄混的(de)現(xiàn)© 象,認為(wèi)紙(zhǐ)片法是(shì)不>(bù)用(yòng)抽濾的(de)濾膜法,其實這(zhè)是↕>σ↕(shì)兩個(gè)完全不(bù)同的(de)檢測方法,今天我們∑←±¶來(lái)了(le)解一(yī)下(xià)這(zhè)兩±φ個(gè)方法的(de)基本原理(lǐ)、操作(zuò)步驟及優缺點等§<。
濾膜法
檢測原理(lǐ)
用(yòng)孔徑為(wèi) 0.45 μm 的(de)微(wēi)孔濾膜過濾水(shuǐ)樣後,将濾膜貼在選擇性培養基上(shàng)培養後,能(néng)形成典型菌落經革蘭氏染色和(hé)證實試驗,來(lái)檢測水(shuǐ)中總大(dà)腸菌群的(de)方法。
檢測步驟
圖 2 濾膜法操作(zuò)步驟
紙(zhǐ)片快(kuài)速法
按最大(dà)可(kě)能(néng)數(shù)(MPN)法,将一(≈↔yī)定量的(de)水(shuǐ)樣以無菌操作(zuò)的(de)方式接種到(÷∑→dào)吸附有(yǒu)适量指示劑(溴甲酚紫±δ↔和(hé)2,3,5-氯化(huà)三苯基四氮唑即TT♣®C)以及乳糖等營養成分(fēn)的(de)無菌濾紙(zhǐ$∏γ)上(shàng),在特定的(de)溫度(37℃)培養18- "↔<24h,當細菌生(shēng)長(cháng)繁殖時(sh≠≠®í),産酸使pH值降低(dī),溴甲酚紫指示劑由紫色變黃(huáng)色,同時(shí),産氣過程相(xiàng)應的(β©÷de)脫氫酶在适宜的(de)pH範圍內(♣φ πnèi),催化(huà)底物(wù)脫氫還(hái)原→σ±TTC形成紅(hóng)色的(de)不(bù)溶性三苯甲臜(T&★TF),即可(kě)在産酸後的(de)黃(huáng)色背景下(xià)顯示©₩出紅(hóng)色斑點(或紅(hóng)暈)。通(tōng)過上(shàng)述指示劑的(de)顔色變化(✔♣huà)就(jiù)可(kě)對(duì)是(shì)否産酸産$β氣作(zuò)出判斷,從(cóng)而确定是(shì)否有(yǒu₩")總大(dà)腸菌群存在,再通(tōng)過查MPN表就(ji↕±₩↕ù)可(kě)得(de)出相(xiàng)應總↔<♠大(dà)腸菌群的(de)濃度值。
圖 3 紙(zhǐ)片法操作(zuò)步驟(目标水(shπ±uǐ)樣、空(kōng)白(bái)、陰性、陽性均按此步驟)
注意:由于飲用(yòng)水(shuǐ)含菌量低(dī),在使©✘♥用(yòng)紙(zhǐ)片快(kuài)速法是(¶★shì)應培養足夠的(de)時(shí)間(j§¶γ$iān)方可(kě)得(de)到(dào)準确∏↕βα的(de)結論。另外(wài)水(shuǐ)質Ω&>÷樣品色度變化(huà)會(huì)幹擾紙(zhǐ)片法的(de)陽★ 性紙(zhǐ)片判讀(dú),随著(zhe)水(shuǐ)質樣品色度的(de≈φ ↕)增加,可(kě)判讀(dú)的(de)陽性紙(zhǐ)片數(shù)§£<會(huì)逐漸減少(shǎo)。
兩種方法比較
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